Жидкостная хроматография

 

Подвижная  фаза в жидкостной хроматографии называется растворителем, а неподвижная - сорбентом. Сорбент может быть твердым веществом либо адсорбированной на твердом веществе жидкостью. Жидкостная хроматография бывает колоночной и плоскостной. В колоночном варианте разделение веществ раствора производят в колонке, а в плоскостном варианте - на бумаге или в тонком слое сорбента. Наиболее широко распространена колоночная хроматография.

            Существует несколько приемов разделения веществ на колонках. В одном из них пробу пропускают через колонку. Компоненты раствора распределяются вдоль сорбента, образуя зоны. Сорбент с зонами называется внутренней хроматограммой. Если вещества окрашены, то можно судить о качественном составе смеси. При отсутствии окраски иногда колонку промывают специальным реагентом- проявителем, который реагирует с определяемым компонентом, изменяя его окраску.

            Для количественного определения состава раствора применяют другие способы хроматографирования. Один из них - фронтальная хроматография, при которой сначала колонку промывают растворителем, а затем непрерывно пропускают раствор смеси веществ. Из колонки первым выйдет наименее сорбируемый компонент, который удается выделить в чистом виде.

            Другой вариант – элюентная хроматография. При таком способе хроматографирования в колонку вводят небольшую порцию смеси и промывают колонку растворителем, называемым элюентом. На выходе из колонки сначала появляется наименее сорбируемое вещество, затем другие вещества в порядке возрастания сорбируемости. Подключив к выходу колонки датчик, получают элюентную хроматограмму, состоящую из ряда пиков. Каждый пик соответствует отдельным компонентам смеси. По оси абцисс откладывают время, а по оси ординат концентрацию веществ.

            Одним из вариантов плоскостной хроматографии является бумажная хроматография. В ней используют специальную фильтровальную бумагу. Каплю анализируемого раствора наносят на конец полоски бумаги и высушивают. Затем бумагу опускают в растворитель так, чтобы он не касался нанесенного пятна. Под действием капиллярных сил растворитель передвигается по бумаге. При этом компоненты смеси распределяются между подвижной и неподвижной фазами, образуя зоны с разделенными компонентами.

            Для преобразования концентраций разделенных веществ в электрический сигнал в жидкостной хроматографии используют следующие свойства жидкостей:

–          светопоглощение выходящего раствора (фотометрические детекторы);

–          показатель преломления (рефрактометрические детекторы);

–          потенциал и электрическая проводимость (электрохимические детекторы).

            Жидкостную хроматографию наиболее широко используют при разделении сложных смесей веществ (нефть, лекарственные препараты, кровь и т.д.). В ряде случаев жидкостная хроматография является лучшим или единственно возможным методом анализа состава растворов.