Биотестирование вод на токсичность (Лабораторная работа)

            Цель работы: Биотестирование вод на токсичность по гибели ракообразных Daphnia magna Straus.

Определение острой токсичности сточных, поверхностных и подземных вод, донных отложений (водных вытяжек), буровых растворов, водных растворов отдельных веществ и их смесей можно проводить по гибели ракообразных Daphnia magna Straus.

Методика основана на установлении различия между количеством погибших дафний в анализируемой пробе (опыт) и культивационной воде (контроль).

Критерием острой летальной токсичности является гибель 50 % дафний и более в опыте по сравнению с контролем за 96 ч биотестирования.

Материалы и реактивы: лупа складная; воронки разные лабораторные; колбы мерные, вместимостью 0,5 и 1,0 дм3; бумага фильтровальная; вата и марля для изготовления ватно-марлевых пробок; пипетки мерные вместимостью от 1 до 10 см3; посуда стеклянная: вместимостью 2 дм3 для культивирования дафний; вместимостью от 100 до 150 см3 для биотестирования; трубки стеклянные внутренним диаметром 5-7 мм для отлова дафний; цилиндры мерные вместимостью 0,1; 0,5 и 1,0 дм3; дрожжи хлебопекарные; культура зеленых водорослей (для корма - родов Chlorella или Scenedesmus);

Биотестирование проводят в помещении, где не хранят и не работают с летучими веществами, не используют обработку помещения инсектицидами.

Объем пробы воды (водной вытяжки), бурового раствора, раствора вещества (смеси веществ) для определения острой летальной токсичности должен быть не менее 1 дм3.

Температура анализируемой пробы при биотестировании должна быть (20±2)°С, концентрация кислорода в пробе в начале биотестирования - не менее 6 мг/дм3. Если его концентрация ниже 6 мг/дм3, пробу аэрируют микрокомпрессором. Воздух должен подаваться равномерно до достижения концентрации кислорода 6 мг/дм3. Во время биотестирования пробу не аэрируют.

Битестирование проводят при рассеянном свете. Не допускается попадание прямых солнечных лучей на тест-объект. Длительность светового периода соответствует естественному.

Плотность посадки односуточных дафний в опыте и контроле должна составлять 10 экземпляров на 100 см3. Повторность трехкратная.

Результаты учитывают, если в конце биотестирования концентрация кислорода в анализируемых пробах была не менее 2 мг/дм3, температура воды составляла (20±2)°С, количество погибших дафний в контроле не превышало 10 %.

В качестве тест-объекта используют лабораторную культуру дафний - Daphnia magna Straus (Cladocera, Crustacea).

Культуру дафний выращивают в стеклянной посуде вместимостью до 2 дм3. Посуду моют питьевой содой и тщательно ополаскивают дистиллированной водой. Нельзя применять синтетические моющие средства и органические растворители.

Для культивирования дафний используют питьевую воду. Пересаживают дафний при помощи стеклянной трубки внутренним диаметром 5-7 мм так, чтобы их не травмировать. Для этого конец трубки помещают под поверхность воды и держат до тех пор, пока дафнии не перейдут в трубку. Аэрировать воду в посуде с дафниями не рекомендуется.

Дафний кормят один раз в сутки суспензией зеленых водорослей и один раз в неделю - суспензией хлебопекарных дрожжей.

В качестве водорослевого корма для дафний рекомендуется использовать зеленые протококковые водоросли - сценедесмус или хлореллу.

Для биотестирования используют дафний в возрасте до 24 ч, которых кормят за 2-3 ч до начала биотестирования. Чтобы получить необходимое количество тест-объектов для биотестирования, 20-30 самок дафний с выводковыми камерами, полными яиц или зародышей, за одни сутки до биотестирования пересаживают в стеклянную посуду емкостью от 0,5 до 1,0 дм3 с водой для культивирования и вносят корм. После появления молоди (каждая самка может выметать от 10 до 40 молодых дафний) взрослых особей удаляют.

 

Задание

            Пробу воды соответствующего разбавления наливают в стеклянные сосуды по 100 см3 (опыт). Другие сосуды наполняют таким же объемом отфильтрованной воды из емкостей, где культивируются дафнии (контроль). Повторность в опыте и контроле трехкратная.

В каждый опытный и контрольный сосуд помещают по 10 дафний в возрасте до 24 ч. Их быстро переносят стеклянной трубкой диаметром 5-7 мм, погрузив ее в воду. Продолжительность биотестирования составляет 96 ч. Во время биотестирования дафний не кормят.

В конце биотестирования визуально подсчитывают количество живых дафний. Живыми считают дафний, которые свободно передвигаются в толще воды или всплывают со дна сосуда не позже, чем через 15 сек после его легкого встряхивания. Остальных дафний считают погибшими.

На основании результатов трех параллельных определений количества живых дафний в контроле и опыте находят средние арифметические количества живых дафний в контроле (опыте).

Рассчитывают в процентах количество погибших дафний в опыте по отношению к контролю.

Вывод о наличии или отсутствии острой летальной токсичности пробы воды (водной вытяжки), бурового раствора или раствора вещества (смеси веществ) делают на основании величины А (процента гибели дафний в опыте по отношению к контролю). Если величина А составляет 50 % дафний и более, считают, что анализируемая проба проявляет острую летальную токсичность.

 


Разблокировка МТС 1078
Разблокировка МТС 1078


Разблокировка Билайн Таб Про
Разблокировка Билайн Таб Про


iTunes Gift Card (Russia) 3000 руб
iTunes Gift Card (Russia) 3000 руб